Что такое бактериологическое исследование, как оно проводится, расшифровка результатов. Бактериологические исследования

Бактериологический (микробиологический) анализ включает в себя исследования кала, мочи, мокроты, маки из зева и т.д. Они проводятся с целью выявить причину инфекционного воспалительного процесса, поставить диагноз и назначить соответствующее лечение.

Бактериологический анализ также позволяет провести определение чувствительности бактерий к антибиотикам, и в ряде случаев к бактериофагам. Он заключается в выделении чистой культуры возбудителя заболевания и его идентификации, то есть изучении свойств микроорганизмов в бактериологической лаборатории с целью принадлежности их к тому или иному виду или роду.

Выделение чистой культуры возбудителя из посева – это первый этап исследования. Последующими являются:

• идентификация микроорганизма;
• определение чувствительности выявленных патогенных микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам.

Для выделения чистых культур могут использоваться как механические, так и биологические методы.

При механическом методе каплю исследуемого материала растирают по поверхности плотной питательной среды в первой, второй и третьей чашках Петри. А само выделение чистой культуры включает ее исследование и отсев на свежую питательную среду.

Биологические методы в свою очередь, основаны на учете специфических свойств выделяемого микроба, отличающего его от других микробов в исследуемом материале. При этом методе используются питательные среды, в которых созданы благоприятные условия для развития определенного вида микробов.

Предварительная заявка на консультацию

Влияние различных факторов на результаты лабораторных исследований

Лабораторные исследования зачастую служат более чувствительными показателями состояния человека, чем его самочувствие. Результаты анализов отражают физико-химические свойства исследуемой пробы и дают объективную диагностическую информацию в цифровом выражении. Важные решения о стратегии ведения пациента часто основаны на небольших изменениях лабораторных данных. Именно поэтому роль лабораторных тестов, а также спектр и количество проводимых исследований, необходимых в процессе диагностики и лечения заболеваний, постоянно возрастает. Однако из практики работы любой диагностической лаборатории известно, что получаемые ими результаты далеко не всегда являются правильными. Это связано с наличием большого количества непатологических факторов, способных оказывать влияние на конечные результаты лабораторных данных.

Как показывает наш опыт работы, основное количество получаемых неудовлетворительных результатов связано с ошибками, допущенными в ходе проведения анализа. Появление случайных и систематических ошибок на любой стадии анализа будет снижать достоверность лабораторных результатов и, как следствие, затруднит постановку правильного диагноза и проведение адекватного лечения.

ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ (ДОЛАБОРАТОРНЫЙ) ЭТАП включает в себя все стадии от назначения анализа клиницистом до поступления пробы в лабораторию на рабочее место, а именно: назначение анализа, взятие биологического материала, его обработку и доставку в лабораторию. Ошибки, возникающие на внелабораторном этапе анализа, составляют от 70% до 95% от общего их числа. Именно они могут оказаться непоправимыми и полностью обесценить весь ход проводимых исследований.

Поэтому правильная организация преаналитического этапа должна стать составной частью любой системы обеспечения качества лабораторного анализа.

При получении, обработке и доставке образцов в лабораторию следует иметь в виду следующие факторы, которые могут быть как устранимыми, так и неустранимыми. Результаты лабораторных исследований подвержены влиянию биологи­ческой и аналитической вариации. Если аналитическая вариация зависит от условий выполнения теста, то величина биологической вариации - от целого комплекса факторов. Общая биологическая вариация исследуемых показателей обусловлена внутрииндивидуальной вариацией, наблюдаемой у одного и того же человека в результате влияния биологических ритмов (разное время дня, года), и межиндивидуальной вариацией, вызванной как эндогенными, так и экзогенными факторами.

Факторы биологической вариации (физиологические факторы, факторы среды, условия взятия пробы, токсичные и терапевтические факторы) мо­гут оказать влияние на результаты лабораторных исследований. Часть из них способна вызывать реальные отклонения лабораторных результатов от референтных значений вне связи с патологическим процессом. К таким факторам относят:

• Физиологические закономерности (влияние расы, пола, возраста, типа сложения, характера и объёма привычной активности, питания);
• Влияние окружающей среды (климат, геомагнитные факторы, время года и суток, состав воды и почвы в зоне обитания, социально-бытовая среда);
• Воздействие профессиональных и бытовых токсичных средств (алко­голь, никотин, наркотики) и ятрогенные влияния (диагностические и лечебные процедуры, лекарственные средства);
• Условия взятия пробы (приём пищи, физическая нагрузка, положение тела, стресс во время взятия пробы и др.);
• Методика взятия крови (способ взятия, средства и посуда, консерван­ты и т.д.);
• Неправильный (по времени) забор материала;
• Условия (температура, встряхивание, влияние света) и время транспортировки биоматериала на исследования в лабораторию.

Рассмотрим влияние наиболее важных факторов на результаты лабора­торных анализов.

ПРИЕМ ПИЩИ

Режим питания, состав принимаемой пищи, перерывы в её приёме оказывают существенное влияние на ряд показателей лаборатор­ных исследований. После приема пищи содержание отдельных продуктов обмена в кро­ви может повышаться или подвергаться изменениям в результате постабсорбционных гормональных эффектов. Определение других аналитов может затрудняться вследствие мутности, вызванной хиломикронемией в послеобеденных пробах крови.

После 48 часов голодания может увеличиваться концентра­ция билирубина в крови. Голодание в течение 72 часов снижает концентрацию глюкозы в крови у здоровых людей до 2,5 ммоль/л, увеличивает концентрацию триглицеридов, свободных жирных кислот без значитель­ных изменений концентрации холестерина. Длительное голодание (2 – 4 недели) также способно влиять на ряд лабораторных показателей. Концентрация общего белка, холестерина, триглицеридов, мочевины, липопротеинов в крови снижается; выведение креатинина и мочевой кислоты почками с мочой повышается. Длительное голодание тесно связано со снижением расхода энергии. Вследствие этого в крови снижается концентрация гормонов щитовидной железы – общего тироксина и еще в большей степени трийодтиронина. Голодание также приводит к увеличению содержания в пробах сыворотки крови кортизола и сульфата дегидроэпиандростерона.

Употребление жирной пищи может повысить концентрацию калия, триглицеридов и щелочной фосфатазы. Активность щелочной фосфатазы в таких случаях может особенно увеличиваться у людей с О- или В-группой крови.

Физиологические изменения после употребления жирной пище в виде гиперхиломикронемии могут увеличивать мутность сыворотки (плазмы) крови и тем самым влиять на результаты измерения оптической плотности. Повышение концентрации липидов в сыворотке крови может быть после употребления пациентом масла, крема или сыра, что приведёт к ложным результатам и потребует повторного анализа.

Определенные виды пищи и режимы питания могут влиять на ряд показателей сыворотки крови и мочи. Потребление большого количества мяса, то есть пищи с высоким со­держанием белка, может увеличить концентрации мочевины и аммиака в сыворотке крови, количества уратов (солей кальция) в моче. Пища с высоким отношением нена­сыщенных жирных кислот к насыщенным может вызвать снижение кон­центрации холестерина в сыворотке крови, а мясная пища вызывает увеличение концентрации уратов. Бананы, ананасы, томаты, авокадо бога­ты серотонином. При их употреблении за 3 дня до исследования мочи на 5-оксииндолуксусную кислоту даже у здорового человека её концентрация может быть повышенной. Напитки, богатые кофеином, увеличивают кон­центрацию свободных жирных кислот и вызывают выход катехоламинов из надпочечников и мозга (концентрация катехоламинов в сыворотке крови повышается). Кофеин способен повышать активность плазматического ренина. Приём алкоголя увеличивает в крови концентрацию лактата, мочевой кислоты и триглицеридов. Повышенное содержание общего холестерина, мочевой кислоты, гамма-глутамилтранспептидазы и увеличение среднего объема эритроцитов может быть связано с хроническим алкоголизмом.

Бессолевая диета может приводить к повышению уровня альдостерона в 3-5 раз. Концентрация билирубина после 48-часового голодания может повыситься в 2 раза, после еды – снижается на 20–25%; изменения уровня билирубина в течение суток могут достигать 15–30%.

ФИЗИЧЕСКИЕ УПРАЖНЕНИЯ

Состояние физической активности обследуемого оказывает большое влияние на результаты.

Физическая нагрузка может оказывать как пре­ходящее, так и длительное влияние на различные параметры гомеостаза. Преходящие изменения включают в себя вначале снижение, а затем уве­личение концентрации свободных жирных кислот в крови, повышение на 180% концентрации аммиака и на 300% - лактата, увеличение активности креатинкиназы, ACT, ЛДГ. Физические упражнения влияют на показатели гемостаза: активируют свертывание крови и функциональную активность тромбоцитов. Изменения указанных показателей связаны с актива­цией метаболизма и они обычно возвращаются к исходным (до физической нагрузки) значениям вскоре после прекращения физической деятельности. Тем не менее, активность некоторых ферментов (альдолаза, КК, ACT, ЛДГ) может оставаться повышенной в течение 24 ч после 1одночасовой интенсив­ной физической нагрузки. Длительная физическая нагрузка увеличивает концентрацию в крови половых гормонов, включая тестостерон, андростендион и лютеинизирующий гормон (ЛГ).

При длительном строгом постельном режиме и ограничении физической активности повышается экскреция с мочой норадреналина, кальция, хлора, фосфатов, аммиака, активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови.

ЭМОЦИОНАЛЬНЫЙ СТРЕСС

Влияние психического стресса (страх перед взятием крови, перед операцией и т.д.) на результаты лабораторных тестов часто недооценивается. Между тем под его влиянием возможны преходящий лейкоцитоз; сни­жение концентрации железа; увеличение уровня катехоламинов, альдостерона, кортизола, пролактина, ангиотензина, ренина, соматотропного гормона, ТТГ и повышение концентрации альбумина, глюкозы, фибриногена, инсулина и холестерина. Сильное беспокойство, сопровождаемое гипервентиляцией, вызывает дис­баланс кислотно-основного состояния (КОС) с увеличением концентра­ции лактата и жирных кислот в крови.

ПОЛ ПАЦИЕНТА

Для целого ряда клинико-химических и гематологических показателей имеются статистически значимые различия между полами. В частности, это относится к уровням стероидных и гликопротеидных гормонов (прогестерон, эстрадиол, тестостерон, 17-ОН прогестерон, ЛГ, ФСГ, пролактин), транспортных белков (ССГ, ТСГ) и других биологически активных соединений (ТГ). В методической литературе имеется обширная информация по этому вопросу, кроме того, ее можно найти в большинстве инструкций по использованию диагностических наборов. Однако следует отметить, что приведенные в литературе референсные интервалы следует рассматривать лишь как ориентировочные. Это связано с наличием конструктивных особенностей наборов от различных фирм-производителей, а также с региональными и расовыми различиями в составе населения. Поэтому в каждой лаборатории рекомендуется установить собственные значения нормальных уровней исследуемых показателей с использованием тех видов наборов, которые регулярно применяются в рутинной практике.

ВОЗРАСТ ПАЦИЕНТА

Концентрация целого спектра аналитов зависит от возраста пациента и может значительно изменяться от момента рождения до старости. Наиболее ярко возрастные изменения выражены для некоторых биохимических показателей (гемоглобин, билирубин, активность щелочной фосфатазы, содержание липопротеинов низкой плотности и др.) а также для ряда аналитов, определяемых иммунохимическими методами. К ним относятся половые стероидные и гликопротеидные гормоны, тиреоиды, АКТГ, альдостерон, ренин, гормон роста (соматотропный), паратгормон, 17-оксипрогестерон, дегидроэпиандростерон, ПСА и др. Желательно, чтобы в каждой лаборатории имелись возрастные нормы для каждого из исследуемых показателей, что позволит более точно интерпретировать полученные результаты.

БЕРЕМЕННОСТЬ

Трактуя результаты лабораторных исследований у беременных, не­обходимо учитывать срок беременности в момент взятия пробы. При физиологической беременности средний объем плазмы возрастает при­мерно от 2600 до 3900 мл, причем в первые 10 недель прирост может быть незначительным, а затем происходит нарастающее увеличение объема к 35-й неделе, когда достигается указанный уровень. Объем мочи также может физиологически увеличиваться до 25% в 3-м триместре. В послед­нем триместре наблюдается 50% физиологическое повышение скорости клубочковой фильтрации.

Беременность является нормальным физиологическим процессом , который сопровождаются значительными изменениями в выработке стероидных, гликопротеидных и тиреоидных гормонов, транспортных белков (ССГ, ТСГ), АКТГ, ренина, а также в целом ряде биохимических и гематологических показателей. Поэтому для правильной интерпретации результатов важно точно указать срок беременности, когда была взята исследуемая проба крови.

При проведении скрининга врожденных пороков развития плода по лабораторным показателям следует иметь в виду, что диагностическая чувствительность и специфичность данного вида исследования в значительной степени будет определяться комбинацией выбранных иммунохимических маркеров. Она должна быть различной на разных стадиях развития плода. Например, для первого триместра беременности наиболее предпочтительным является определение АФП, свободной 6-субъединицы ХГЧ и ассоциированного с беременностью белка А (РАРРА), а для второго триместра - АФП, общего ХГЧ и свободного эстриола. Все указанные виды анализа должны проводиться в строго рекомендуемые сроки беременности, а каждая лаборатория, занимающаяся скрининговыми исследованиями, должна располагать собственной постоянно обновляемой и пополняемой базой медиан уровней исследуемых маркеров для каждой недели беременности.

МЕНСТРУАЛЬНЫЙ ЦИКЛ

Статистически значимые изменения концентрации могут быть выз­ваны колебаниями гормонального фона при менструации. Так, концент­рация альдостерона в плазме определяется в два раза выше перед овуля­цией, чем в фолликулярной фазе. Подобным образом ренин может про­явить предовуляторное повышение.

Менструальный цикл является нормальным физиологическим процессом, который сопровождается значительными изменениями в выработке половых, тиреоидных гормонов, транспортных белков, АКТГ, ренина, а также в целом ряде биохимических и гематологических показателей. Для правильной интерпретации результатов важно точно указать день менструального цикла, когда была взята исследуемая проба крови.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ РИТМЫ

Существуют линейные хронобиологические ритмы - например, возраст пациента, циклические ритмы - такие, как циркадные и сезонные, а также другие биологические циклы - например, менструальный цикл.

Циркадные ритмы аналита, т.е. изменения его концентрации в течение суток, наиболее ярко выражены у кортизола, АКТГ, альдостерона, пролактина, ренина, ТТГ, паратгормона, тестостерона и др. Отклонения концентраций от среднесуточных значений могут достигать 50%-400%, и этот фактор обязательно должен приниматься во внимание.

Суточные колебания содержания некоторых аналитов в сыворотке крови

	Максимальная концентрация (время суток)	Минимальная концентрация (время суток)	Амплитуда (% от средней за сутки)
Кортизол
Тестостерон
Пролактин
Альдостерон
Адреналин

Например, циркадный ритм кортизола может являться причиной недостоверных результатов теста на толерантность к глюкозе, если он проводится во второй половине дня.

Для того чтобы не затруднять процесс интерпретации результатов, отбор проб для анализа нужно проводить строго в определенное время суток, обычно между 7:00 и 9:00 часами утра. Следует иметь в виду, что референсные интервалы большинства тестов, приведенных в справочной литературе, установлены именно для этого промежутка времени.

При проведении специальных исследований, например, при установлении индивидуального циркадного ритма секреции гормона, в течение суток берется несколько проб анализируемого материала. В документах, сопровождающих такие образцы, необходимо указать точное время взятия каждого из них.

На циркадный ритм могут накладываться индивидуальные ритмы сна, еды, физической активности, которые не следует путать с действительно суточными колебаниями. Для того, чтобы исключить индивидуальные ритмы при определении уровня аналитов, секретируемых порциями (ренин, вазопрессин, тестостерон, пролактин и др.), можно использовать смешанную пробу, полученную из трех образцов крови, взятых с интервалом в 2-3 часа. В некоторых случаях следует учитывать сезонные влияния. Например, содержание трийодтиронина на 20% ниже летом, чем зимой.

ПРИЕМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

Прием может отражаться на количественном содержании в организме целого ряда анализируемых показателей. Например, уровень ТТГ снижается при лечении допамином, концентрация общих и свободных фракций тиреоидных гормонов будет изменяться при введении фуросемида, даназола, амиодарона и салицилатов, а применение некоторых противоязвенных препаратов может повышать уровень пролактина у мужчин.

Присутствие лекарственных препаратов в биологическом материале – например, контрацептивов, салицилатов, андрогенов и др. - может специфическим (перекрестная реакция) или неспецифическим образом (интерференция) влиять на результаты лабораторных исследований при определении концентрации стероидных и тиреоидных гормонов, а также специфических связывающих белков крови. Прием аспиринсодержащих препаратов при определении длительности кровотечения по Дуке должен быть отменен за 7 – 10 дней до исследования. Если этого не сделать, можно получить патологический результат исследования. Поэтому проведение медикаментозной терапии, могущей искажать результаты анализа, следует назначать после взятия проб крови.

При проведении лекарственного мониторинга точное время взятия крови является очень важным параметром для правильной интерпретации результатов исследования.

Широкий спектр лекарственной интерференции в ходе лабораторных исследований рассмотрен во многих обзорах и книгах. Чтобы исключить возможность получения ложных результатов, обусловленных применением лекарственных препаратов, рекомендуется консультироваться с клиницистами, а также использовать соответствующие справочники.

При подготовке обследуемых к проведению биохимических иссле­дований приняты следующие подходы: лекарства, мешающие определению компонентов, исключаются до взя­тия биоматериала, если они даются не по жизненным показаниям; утренний прием лекарств проводится только после взятия биомате­риала; взятие крови с диагностической целью проводится перед инфузией лекарств и растворов. Загрязнение лабораторных проб инфузионными растворами являет­ся самой обычной и часто встречаемой формой преаналитической ин­терференции в больницах. Рекомендуется информировать лабораторию о том, когда и какое вливание было проведено пациенту, и когда была взята проба крови.

Пробу крови никогда не следует брать из сосуда, расположенного проксимально месту инфузии. Пробы следует брать из другой руки, из вены, в которую не проводится вливание.

Влияние ЛС на результаты лабораторных исследований может быть двух типов:

1. Физиологическое влияние in vivo (в организме пациента) ЛС и их ме­таболитов;
2. Влияние in vitro (на химическую реакцию, используемую для опреде­ления показатели) благодаря химическим и физическим свойствам ЛС (интерференция).

Физиологическое влияние ЛС и их метаболитов во многом известны практическим врачам. Рассмотрим зна­чение интерференции, то есть вмешательства постороннего фактора в ре­зультаты анализа.

Интерференция может быть вызвана наличием в пробе биоматериала как эндогенного, так и экзогенного вещества. К основным эндогенным интер­ферирующим факторам относят следующие:

• Гемолиз, т.е. разрушение эритроцитов с выходом в жидкую часть крови ряда внутриклеточных компонентов (гемоглобин, ЛДГ, калия, магния и др.), что изменяет истинные результаты определения концентрации/активности таких компонентов крови, как билирубин, липаза, КК,ЛДГ, калий, магний и др;
• Липемия, извращающая результаты ряда колориметрических и нефелометрических методов исследования (особенно при исследовании фосфора, общего билирубина, мочевой кислоты, общего белка, электролитов);
• Парапротеинемия, вызывающая изменения результатов определения некоторыми методами фосфатов, мочевины, КК, ЛДГ, амилазы.

Наиболее частые экзогенные интерферирующие факторы - ЛС или их метаболиты. Так, при определении катехоламинов флуориметрическим ме­тодом в моче интенсивную флюоресценцию может вызывать принимаемый пациентом тетрациклин; метаболит пропранолола 4-гидррксипропранолол интерферирует при определении билирубина методами Йендрассика-Грофа и Эвелина-Меллоя.

Выявить интерференцию ЛС - одна из задач врача клинической лабораторной диагностики. Важный шаг для решения этой проблемы - контакт с клиницистом для выяснения характера принимаемых пациентом препаратов.

КУРЕНИЕ

У курильщиков может быть повышена концентрация карбоксигемоглобина, катехоламинов в плазме крови и кортизола в сыворотке крови. Изменения концентра­ции этих гормонов часто приводят к снижению количества эозинофилов, в то время как содержание нейтрофилов, моноцитов и свободных жир­ных кислот увеличивается. Курение приводит к увеличению концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, среднего объёма эритроцита (MCV) и снижению количества лейкоцитов. Обнаружено повышение активности гаммаглутамилтрансферазы на 10% при потреблении 1 пачки сигарет в день; возможно удвоение активности по сравнению с референтными значениями при потреблении большего количества сигарет.

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ И ЛЕЧЕБНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ

На результаты лабораторных исследований могут оказывать влия­ние следующие диагностические и лечебные мероприятия:

• Оперативные вмешательства;
• Вливания и переливания;
• Пункции, инъекции, биопсии, пальпация, общий массаж;
• Эндоскопия;
• Диализ;
• Физическое напряжение (например, эргометрия, физические упраж­нения, ЭКГ);
• Функциональные тесты (например, пероральный тест на толерант­ность к глюкозе);
• Прием рентгеноконтрастных и лекарственных веществ;
• Ионизирующее излучение.

Например, уровень ПСА в течение нескольких дней может быть повышен после массажа простаты или катетеризации мочевого пузыря. Любые манипуляции с молочной железой или тепловые процедуры (например, сауна) приводят к значительному возрастанию уровня пролактина. Чтобы предотвратить такое влияние, взятие проб необходимо про­водить до выполнения диагностических процедур, способных искажать результаты теста. Влагалищное кровотечение, произошедшее перед взятием пробы крови, может влиять на результат скрининга: кровотечение может увеличивать уровень АФП в крови матери. В этих условиях рекомендуется отложить анализ ~ на одну неделю после остановки кровотечения.

ПЕРИОДИЧНОСТЬ ВЗЯТИЯ ПРОБ

Повторные взятия проб крови широко используются в динамических исследованиях - при проведении стимуляционных тестов, для оценки эффективности проводимого лечения, при прогнозировании исхода заболевания, при лекарственном мониторинге, а также в целом ряде других случаев. Интервалы между взятием образцов, помимо конкретных задач исследования, должны определяться с учетом следующих факторов:

• Периода биологической полужизни определяемого аналита. Например, для оценки уровня ПСА в постоперационном периоде отбор крови для исследования должен проводиться не ранее, чем через 10-14 дней после хирургического вмешательства;
• Факмакокинетических свойств препаратов при проведении терапевтического лекарственного мониторинга. Например, забор крови для определения циклоспорина А должен производиться непосредственно перед приемом следующей его дозы, а для сердечных гликозидов - через 4 часа после введения препарата.
• Динамики изменения концентрации аналита в ходе нормальных или патологических процессов (мониторинг беременности, диагностика и мониторинг опухолевых и инфекционных заболеваний и др.). Обычно при этом индивидуальные колебания уровней исследуемых аналитов могут быть очень значительными (свободный эстриол, ХГЧ, АФП и др.). В этих случаях средние значения нормы или ее диапазоны не являются достаточно информативными для постановки диагноза. Вместо них используют значения медиан нормальных концентраций.

При мониторинге опухолевых заболеваний, а также для оценки эффективности проводимого лечения в качестве точки отсчета используются индивидуальные базовые уровни онкомаркеров до начала терапии. Последующие заборы крови проводятся через строго определенные клиницистами промежутки времени. Этот же принцип используется при диагностике и лечении инфекционных заболеваний - выявление специфических антител к возбудителю и динамика их уровней в ходе лечения.

При хранении образцов мочи при комнатной температуре может теряться до 40% глюкозы после 24-часового хранения.

ПОЛОЖЕНИЕ ТЕЛА ПАЦИЕНТА ПРИ ЗАБОРЕ КРОВИ

Положение тела пациента также влияет на ряд показателей. Переход из положения лёжа в положение сидя или стоя приводит к гидростатическому проникновению воды и фильтрующихся веществ из внутрисосудистого пространства в интерстициальное. Вещества, имеющие большую молекулярную массу (белки), и клетки крови со связанными с ними веществами не проходят в ткани, поэтому их концентрация в крови повышается (ферменты, общий белок, альбумин, железо, билирубин, ХС, ТГ, ЛС; связанные с белками, кальций). Могут увеличиваться концентра­ция гемоглобина, гематокрит, количество лейкоцитов. Отбор крови для определения ряда аналитов - таких, как альдостерон, эпинефрин, норэпинефрин, предсердный натрийуретический пептид, а также для оценки активности плазматического ренина - следует проводить в положении лежа и/или стоя при спокойном состоянии пациента. В направлении должна быть сделана специальная отметка о времени и условиях получения пробы.

МЕСТО И ТЕХНИКА ЗАБОРА КРОВИ

Место и техника забора крови также могут оказать существенное влия­ние на результаты лабораторных тестов (например, наложение жгута на период времени более 2 мин при заборе крови из вены может привести к гемоконцентрации и увеличению концентрации в крови белков, факто­ров коагуляции, содержания клеточных элементов). Лучшее место забора крови на анализы - локтевая вена. Следует также отметить, что веноз­ная кровь - лучший материал не только для определения биохимичес­ких, гормональных, серологических, иммунологических показателей, но и для общеклинического исследования. Это обусловлено тем, что применя­емые в настоящее время гематологические анализаторы, с помощью ко­торых проводят общеклинические исследования крови (подсчёт клеток, определение гемоглобина, гематокрита и др.), предназначены для работы с венозной кровью, и в большинстве своём в странах, где их производят, они сертифицирова­ны и стандартизированы для работы только с венозной кровью. Выпускае­мые фирмами калибровочные и контрольные материалы также предназна­чены для калибровки гематологических анализаторов по венозной крови.

Помимо этого, при заборе крови из пальца возможен ряд методических особенностей, которые стандартизировать очень трудно (холодные, цианотичные, отёчные пальцы, необходимость в разведении исследуемой крови и др.), что приводит к значительным разбросам в получаемых результатах и как следствие - к необходимости повторных исследований для уточ­нения результата.

Для общеклинического исследования кровь из пальца рекомендуют забирать в следующих случаях:

• При ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;
• При наличии у пациента очень мелких вен или их малой доступности;
• При выраженном ожирении пациента;
• При установленной склонности к венозному тромбозу;
• У новорождённых.

Пункцию артерии для забора крови используют редко (преимущественно для исследования газового состава артериальной крови).

ДРУГИЕ ФАКТОРЫ

Среди других факторов, влияющих на результаты ис­следований, имеют значение расовая принадлежность, географическое положение местности, высота над уровнем моря, температура окружающей среды.

Например; уровни АФП выше у женщин негроидной расы по сравнению с европеоидной расой. Активность ГГТ приблизительно в два раза выше у афро-американцев по сравнению с белым населением.

Как правильно подготовиться к исследованиям в клинико-диагностической лаборатории

АНАЛИЗ КРОВИ (КЛИНИЧЕСКИЙ, БИОХИМИЧЕСКИЙ, ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ)

• Исследование производится утром натощак – между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 – 12 часов. Вечером предшествующего дня рекомендуется необильный ужин. Желательно за 1 – 2 дня до обследования исключить из рациона жирное, жареное и алкоголь. Если накануне состоялось застолье или было посещение бани или сауны – необходимо перенести лабораторное исследование на 1 – 2 дня;
• Накануне исследования лечь спать в обычное время и встать не позднее чем за 1 час до взятия крови;
• По возможности пробы следует брать между 7 и 9 часами утра;
• Период воздержания от приема алкоголя должен быть не менее 24 ч до сдачи анализа;
• За 1 час до взятия крови необходимо воздержаться от курения;
• Не следует сдавать кровь после рентгенологических исследований, физиотерапевтических и лечебных процедур, способных оказать влияние на результаты теста;
• Необходимо исключить факторы, влияющие на результаты исследований: физическое напряжение (бег, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. Перед процедурой следует отдохнуть 10 – 15 минут и успокоиться. Для исключения влияния изменения положения тела обследуемый должен находиться в покое, сидеть или лежать не менее 5 мин. При динамическом наблюдении за пациентом взятие материала нуж­но проводить в идентичном положении тела;
• Необходимо помнить, что результат исследования может быть искажен действием принимаемых лекарственных препаратов. Поэтому перед сдачей анализа следует проконсультироваться у врача о возможности ограничения приема лекарственных препаратов для подготовки к исследованию. Рекомендуется отказаться от приема лекарственных препаратов перед сдачей крови на исследование, то есть забор крови производится до приема лекарственных препаратов;
• Учитывая суточные ритмы изменения показателей крови повторные исследования целесообразно проводить в одно и то же время;
• В разных лабораториях могут применяться разные методы исследования и единицы измерения. Чтобы оценка результатов обследования была корректной и была приемлемость результатов, желательно проводить исследования в одной и той же лаборатории, в одно и то же время.

ТЕСТ ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЛЮКОЗЕ (САХАРНАЯ КРИВАЯ)

Пероральный тест толерантности к глюкозе проводится, если клинические симптомы сахарного диабета отсутствуют, а содержание глюкозы в крови натощак ниже патологического уровня и находится в пределах физиологической нормы (предварительно необходимо провести исследование глюкозы в крови натощак).

Цель теста – определить эффективность работы инсулиновыделительного механизма поджелудочной железы и глюкозораспределительной системы организма. Необходимо подготовиться к этому тесту изменением диеты и приема лекарственных препаратов, по меньшей мере, за 3 дня до проведения теста. Очень важно точно следовать приведенной ниже инструкции, так как только в этом случае будут получены ценные результаты теста:

• Количество углеводов в пище должно быть не менее 125 граммов в день в течение 3 дней перед проведением теста;
• Нельзя ничего есть в течение 12 часов, предшествующих началу теста, но ни в коем случае голодание не должно быть более 16 часов;
• Не позволять себе физические нагрузки в течение 12 часов перед началом теста и во время проведения теста.

Методика проведения теста. Исследование производится дважды с интервалом в 2 часа. Утром, натощак, производится забор крови на глюкозу. Затем пациенту дают определенное количество глюкозы (в зависимости от массы тела), растворенной в теплой воде. Нагрузку следует принять медленно, не залпом, но не дольше, чем за 5 минут. За это время формируется адекватная физиологическая реакция на прием большого количества углеводов. После приема нагрузки производят повторный забор крови на глюкозу через 2 часа. Вместо глюкозы можно использовать пробный завтрак, содержащий не менее 120 граммов углеводов, 30 грамм из которых должны составлять легкоусвояемые (сахар, варенье, джем).

ОСОБЕННОСТИ ПОДГОТОВКИ К ОТДЕЛЬНЫМ ЛАБОРАТОРНЫМ ТЕСТАМ

Исследование холестерина и липидного спектра

Для определения холестерина и липидного спектра забор крови производится строго после 12 – 14 часового голодания. За 2 недели необходимо отменить препараты, понижающие уровень липидов в крови, если не ставиться цель определить гиполипидемический эффект терапии этими препаратами. Накануне взятия крови должен быть исключен прием алкоголя: присутствие алкоголя в крои является распространенной причиной выявления гипертриглицеридемии, даже у голодавших пациентов. Если исследование липидов проводится у больного, перенесшего инфаркт миокарда, то кровь следует брать либо в течение 24 часов после инфаркта, либо по истечении 3 месяцев, поскольку в период выздоровления метаболизм липидов нарушен.

Мочевая кислота

Необходимо в предшествующие исследованию дни соблюдать диету – отказаться от употребления богатой пуринами пищи: печени, почек, максимально ограничить в рационе мясо, рыбу, кофе, чай, алкоголь. Противопоказаны интенсивные физические нагрузки. Обязательна отмена таких лекарственных препаратов, как кофеин, теобромин, теофилин, салицилаты, аскорбиновая кислота, антибиотики, сульфаниламиды, производные тиазола.

Кортизол

Накануне исследования исключить прием таких препаратов как: глюкокортикоиды, эстрогены, пероральные контрацептивы. Также необходимо исключить прием алкоголя, физические упражнения, курение, стрессовые ситуации. Забор крови осуществляется не позднее 2-х часов после сна и до 10 часов утра.

Простатспецифический антиген (ПСА)

Забор крови должен быть произведен до пальпаторного исследования и массажа предстательной железы (ПЖ), лазерной терапии, рентгенографии, цистоскопии, колоноскопии. Эти лечебно – диагностические мероприятия могут вызвать более или менее выраженный и длительный подъем уровня ПСА в крови. Так как степень таких изменений непредсказуема, забор крови необходимо проводить или до или спустя неделю после проведенных манипуляций.

Диагностики инфекционных заболеваний (в том числе урогенитальные инфекции)

Забор крови для диагностики производится до начала приема антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее чем через 10 – 14 дней после их отмены. При выполнении исследований на наличие инфекций следует учитывать, что в зависимости от периода инфицирования и состояния иммунной системы у любого пациента может быть ложноотрицательный результат. Но, тем не менее, отрицательный результат не исключает полностью наличие инфекции и в сомнительных случаях необходимо провести повторный анализ.

Иммунограмма

Анализ крови сдается строго натощак, после 12-часового голодания и обязательно до начала приема антибактериальных, противовоспалительных и гормональных препаратов или не ранее чем через 2 недели после их отмены. Если накануне исследования было повышение температуры, какое либо острое или обострение хронического заболевания, то лучше перенести срок сдачи анализа.

Аллергены

Для исключения ложноотрицательных результатов необходимо воздержаться от приема противоаллергенных препаратов за 3 – 5 дней до сдачи анализа крови.

Пролактин

Забор крови производится утром, не ранее, чем через 3 часа после пробуждения. Учитывая, что уровень пролактина может повышаться в результате физического или эмоционального стресса, после половых актов, после пребывания в сауне, приема алкоголя, необходимо перед исследованием исключить указанные факторы.

Исследование на тиреоидные гормоны

За 2 – 3 дня до проведения исследования исключается прием йодсодержащих препаратов, за 1 месяц – тиреоидных гормонов (чтобы получить истинные базальные уровни), если нет специальных указаний врача- эндокринолога. Однако, если целью исследования является контроль за дозой препаратов тиреоидных гормонов, забор крови производится на фоне приема обычной дозы.

Тиреоглобулин

Исследование целесообразно проводить спустя как минимум 6 недель после тиреоэктомии, либо проведенного лечения. Если назначены такие диагностические процедуры, как биопсия или сканирование ЩЖ, то исследование уровня ТГ в крови нужно строго проводить до процедур.

Соматотропный гормон

За 3 дня до взятия крови необходимо исключить спортивные тренировки, стрессовые ситуации. За 1 час до взятия крови - курение. Исследование проводится натощак (через 12 часов после последнего приема пищи). Пациент должен находиться в полном покое в течение 30 минут перед взятием крови. Не допускать стресса в процессе взятия крови.

ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

Для общего анализа мочи предпочтительно использовать «утреннюю» мочу, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре. Моча должна быть собрана после тщательного туалета наружных половых органов (несоблюдение этого правила может повлечь за собой выявление повышенного количества эритроцитов и лейкоцитов в моче, что затруднит постановку правильного диагноза) в сухую, чистую, хорошо отмытую от чистящих и дезинфицирующих средств посуду (для сбора мочи лучше использовать одноразовые пластиковые контейнеры). Для анализа можно собирать всю мочу, однако, в нее могут попасть элементы воспаления мочеиспускательного канала, наружных половых органов. Поэтому, как правило, первую порцию мочи не используют. Вторую, среднюю, порцию мочи собирают в чистую посуду, не касаясь склянкой тела. Посуда с мочой плотно закрывается крышкой. Моча, собранная для общего анализа, может храниться не более 1,5 – 2 часов (обязательно на холоду!). Длительное хранение мочи при комнатной температуре приводит к изменению физических свойств, разрушению клеток и размножению бактерий.

Накануне сдачи анализа следует исключить алкоголь, маринады, копчености, сахар, мед.

СБОР СУТОЧНОЙ МОЧИ ДЛЯ БИОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

Суточная моча собирается в течение 24 часов на обычном питьевом режиме. Утром в 6 – 8 часов освобождается мочевой пузырь (эта порция мочи выливается), а затем в течение суток собирается вся моча в чистый широкогорлый сосуд с плотно закрывающейся крышкой, емкостью не менее 2 литров. При этом емкость с мочой необходимо сохранять в течение всего времени в прохладном месте (оптимально – в холодильнике на нижней полке – при 4 – 8 С), не допуская ее замерзания. Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор (время начала и конца сбора отмечают). Если не вся моча доставляется в лабораторию, то количество суточной мочи измеряется мерным цилиндром, часть отливается в чистый сосуд, в котором ее доставляют в лабораторию, и обязательно указывается объем суточной мочи. Перед сдачей мочи на анализ нежелательно применение лекарственных веществ, так как некоторые из них (в частности, аскорбиновая кислота, входящая в состав комплексных витаминных препаратов) оказывают влияние на результаты биохимических исследований мочи.

Несоблюдение правил сбора, сроков и режима хранения проб, полученных для исследований, приводит к отрицательному результату!

Сдавайте анализы постоянно в одной и той же лаборатории – и вашему врачу будут примерно известны Ваши личные показатели нормы и любое отклонение от нормы будет сразу им замечено.

По своей сути бак посев является микробиологическим лабораторным исследованием биологических материалов человека, осуществляемым их посевом на те или иные питательные среды при определенных температурных режимах. Бакпосев выявляет патогенные или условно-патогенные микроорганизмы и определяет их чувствительность к тем или иным медикаментозным препаратам.

Бактериологический посев различается в зависимости от используемых биологических материалов:

• Бак посев крови (или полностью – бактериологический посев крови), показанный больным с лихорадкой и ознобом. Также бакпосев крови врачи назначают лицам с подозрением на эндокардит, иммуносупрессию или внутрисосудистую инфекцию. Применяется и бакпосев крови на стерильность.
• Бак посев кала, позволяющий выявить дисбактериоз. Как правило, бакпосев кала назначается пациенту тогда, когда обычные анализы не способны выявить возбудителя той или иной инфекции. О том, как сдавать бак посев кала, должны рассказывать врач и лаборант.
• Бак посев из носа и зева, показанный при ангинах, синуситах и ринитах. Бакпосев из зева позволяет выявить вирусы и бактерии, не выявляемые обычными анализами. А, например, бакпосев из носа в некоторых случаях помогает начать эффективное лечение без применения антибиотиков.
• Бак посев из глаза, незаменимый при гнойно-воспалительных процессах глаз. Бак посев глаза, как и аналогичные посевы из других органов, позволяет выявить не проявляющую себя при других анализах инфекцию.
• Бак посев мокроты, используемый при диагностике инфекций нижних дыхательных путей и туберкулеза легких. Бакпосев мокроты во многих случаях просто незаменим. Сбор мокроты на бак посев должен осуществляться под контролем лаборанта.
• Бак посев выделений включает в себя посев всех биологических жидкостей, которые выделяются человеком в процессе его жизнедеятельности.
• Бак посев желчи применяют при воспалительных заболеваниях печени и желчного пузыря, таких как холецистит, холангит, желчнокаменной болезни. Используют его для выявления микрофлоры и выбора наилучшей тактики лечения. Нормальный результат – отсутствие флоры. Если в результате бакпосева выделен любой микроорганизм, то он является положительным. Чаще всего высевают энтерококк. При обнаружении золотистого стафилококка можно сделать вывод о том, что есть печёночный или диафрагмальный абсцесс. Желчь собирают при зондировании или операции и помещают в контейнер 3-4 мл.
• Бак посев из уретры у мужчин позволяет выявить заболевания, передающиеся половым путем. Бак посев из уретры незаменим в диагностике . Также, как у мужчин, бак посев из уретры у женщин применяется после того, как обычные анализы не выявили возбудителя присутствующего заболевания.
• Бактериологический посев с кожи лица поможет выявить золотистый стафилококк и других представителей патогенной микрофлоры, а также грибки. Бак посев с кожи лица проводится со взятием кожного жира и эпителия.
• Расшифровка бак посева мазка проводится в лаборатории. Бакпосев мазка содержит количество представителей нормальной, условно-патогенной и патогенной микрофлоры, а потому он весьма информативен. О том, что показывает бак посев мазка, пациент может узнать у своего лечащего врача.

Что такое бак посев

Ответ на вопрос о том, что такое бакпосев в гинекологии, достаточно прост. Что такое бакпосев? Любой бакпосев – это исследование, подразумевающее высадку биологического материала в определенную среду с целью выращивания имеющихся в нем патогенных микроорганизмов.

Что выявляет бак посев? В любых выделениях человеческого организма данный анализ может выявить не только бактерии и вирусы, но и их количество на том или ином участке. В гинекологии он также применяется для выявления различных патогенных организмов, которые не могут быть обнаружены в ходе других анализов.

Что может показать бакпосев

Вопрос о том, что может показать бак посев, встречается достаточно часто. Какие инфекции анализ на бакпосев у женщин может выявить? А что показывает бакпосев на микрофлору? Ответы на эти и другие вопросы мы приводим ниже.

В зависимости от выявляемого возбудителя различают:

• Бакпосев на стафилококк. Бак посев на стафилококк показан при беременности и позволяет выявить золотистый, эпидермальный, сапрофитный и гемолитический стафилоккоки, опасные для беременной и плода.
• Бакпосев на хламидии. Он показан при сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатах анализов на данное заболевание. Бак посев на хламидии дает достоверный результат и позволяет правильно назначить лечение.
• Бак посев на . Он показан лицам с жалобами на основные проявления заболевания, в случае выявления у партнера означенной болезни, при вероятном риске бытового заражения. Остается информативным не только до или после лечения, но и во время проведения терапии.
• Бак посев на туберкулез. Он показан при подозрении на туберкулез органов дыхания. Для получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее трех проб мокроты.
• Бакпосев на энтерококки (может встречаться в расшифровке в виде: «в бакпосеве enterococcus faecalis»). Позволяет выявить условно-патогенные энтерококки – представителей нормальной микрофлоры пищеварительного тракта человека, опасные и патогенные для состава микрофлоры мочеполовой системы.
• Бак посев на коклюш. Позволяет выявить заболевание и разработать оптимальную программу лечения. Он показан при наличии слабого кашля, сохраняющегося на протяжении 1-2 недель, незначительного повышения температуры, выраженного недомогания.
• Бак посев на дизентерийную группу. Анализ показан при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сопровождающихся поносами. А также при госпитализации в стационар, наличии уретрита, вульвовагинита, цервицита, цистита. Позволяет выявить сальмонеллез и дизентерию у детей и взрослых, эшерихиозы у детей.

Сколько делается анализ

В большинстве случаев ответы на вопрос о том, сколько делается бак посев, будут следующими:

• 5-7 дней при исследовании слизи из носоглотки;
• 4-7 дней при исследовании мочи и кала (в данном случае сроки бакпосева уточняются лаборантом) (Основная статья: « « );
• 7 дней при исследовании соскоба урогенитального тракта;
• 4-7 дней при исследовании на общую флору;
• 10 дней при исследовании крови на стерильность.

Так или иначе, о том, сколько дней готовится бак посев из того или иного органа, необходимо узнавать в лаборатории, в которой вы его сдаете.

Результаты бак посева

Результаты бак посева выдаются на руки пациенту. Сама расшифровка бак посева производится микробиологом в лаборатории. Именно он выдает врачу заключение, содержащее данные по количеству тех или иных микроорганизмов, а также их чувствительности к антибиотикам.

Расшифровка бакпосева помогает врачу в случае превышения норм присутствия грибков или бактерий, а также наличия признаков воспаления, назначить соответствующее данному случаю лечение.

Как сдавать бак посев

На самом деле вопрос о том, как сдавать бак посев, достаточно актуален. И это не удивительно. Качество результата напрямую зависит от правильности забора материала исследования. Так как правильно сдать бакпосев?

Как подготовиться к бакпосеву? При заборе материала следует придерживаться следующих правил:

• посуда, использующаяся при заборе, должна быть стерильной;
• забор должен быть осуществлен до начала лечения антибиотиками;
• доставка материала в лабораторию должна быть оперативной, в противном случае микроорганизмы просто погибнут (кал, например, должен быть доставлен в теплом виде);
• при заборе мочи должна быть использована средняя порция мочи, взятая после утренних гигиенических процедур (доставка мочи в лабораторию должна быть осуществлена в течение 2-х часов);
• при заборе мазка из носа и зева нельзя чистить зубы, пить, есть и полоскать нос и рот дезинфицирующими растворами;
• кал должен быть набран в стерильную посуду стерильно же лопаточкой (доставка в лабораторию должна быть осуществлена в течение 5-ти часов);
• кровь может быть взята до начала приема антибиотиков;
• мокрота собирается с утра натощак во время приступа кашля со слизью в стерильную посуду (перед забором следует почистить зубы; доставка материала в лабораторию должна быть осуществлена в течение часа);
• выделения из половых органов у женщин производится не ранее, чем через 14 дней после менструации и не ранее, чем через месяц после отмены антибиотиков (мочится на протяжении 2-х часов перед забором материала нельзя), мужчинам нельзя мочиться на протяжении 4-6 часов перед взятием пробы;
• также стоит отметить, что бак посев у детей нисколько не отличается от «взрослых» методов. Материал на бак посев у ребенка можно брать с любых слизистых оболочек, как и собирать любые биологические жидкости для него.

Бакпосев на микрофлору

Бакпосев на микрофлору – что это такое? На сегодняшний день этот метод используется везде, где причиной заболевания являются болезнетворные микробы – в хирургии, урологии, гинекологии, дерматологии, гастроэнтерологии, оториноларингологии и т.д.

В подавляющем большинстве случаев бакпосев на микрофлору позволяет назначить адекватное лечение болезней, вызванных неспецифическими микроорганизмами, ответственными за тот или иной инфекционно-воспалительный процесс.

В качестве материала для бак посева на флору берется любая биологическая жидкость организма, содержащая максимальное количество изучаемых микроорганизмов – секрет простаты, кал, моча, кровь, содержимое уретры, влагалищное отделяемое, мокрота, гной и т.д.

Расшифровка бакпосева на микрофлору производится лаборантами той лаборатории, в которой был сдан материал. Далее врач в подробностях расскажет пациенту, как быть и что предпринимать для последующего лечения обнаруженного заболевания.

Бактериологический посев - один из видов лабораторного исследования, основанный на анализе биологического материала посредством его высева на специальные питательные среды. По результатам бакпосева выявляется наличие/отсутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов определенного типа с целью дальнейшего изучения их физико-химических свойств и определения схемы лечения диагностированных инфекционных заболеваний.

Ценность данного способа исследований заключается в том, что он позволяет не только обнаружить болезнетворные бактерии, но и установить степень их чувствительности к препаратам антибактериального действия. Иными словами, на основании анализа можно безошибочно подобрать комплекс медикаментозных средств для проведения успешной терапии.

Основными плюсами бактериологического посева можно назвать следующие:

• Высокая точность исследований. В отличие от ИФА (иммуноферментный анализ), ПЦР (полимеразная цепная реакция), вероятность получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов практически равна нулю.
• В качестве биологического материала возможно использование абсолютно любой жидкости, выделяемой из организма человека.
• Разработка атибиотикограммы. То есть, установление степени воздействия на выявленные микробы того или иного антибиотика, что позволяет проводить лечебные назначения с максимально высокой точностью.

Недостатки метода

К минусам бакпосева можно отнести такие факторы:

• Сложность выполнения процедуры и необходимость соблюдения специфических требований к забору материала.
• Длительность ожидания результат исследований.
• Наличие специальной лаборатории, а также соответствующей квалификации медперсонала, задействованного в проведении анализа.

Цель проведения бактериологического посева

Метод бакпосева достаточно распространен в медицинской практике, применяясь для диагностики заболеваний в самых разных областях медицины: хирургии, онкологии, гастроэнтерологии, отоларингологии и т. д. В гинекологии и урологии данный вид лабораторного анализа используется для исследования микрофлоры в целях диагностики следующих возбудителей:

• микоплазмоза и уреаплазмоза;
• трихомониаза;
• кандидоза (молочницы);
• хламидиоза.

По итогам исследования можно не только выявить наличие патогенных бактерий, но и определить их количественных состав. Что, в свою очередь, дает понимание того, на какой стадии прогрессирует болезнь, и скоординировать дальнейшее лечение.

Помимо мазка из половых органов для бакпосева используется также и ряд других разновидностей биологического материала. Например:

• Кровь - для проверки на стерильность, при внутрисосудистых инфекциях, эндокардите.
• Слизистая из носа, горла - для выявления вирусов и бактерий, провоцирующих риниты, синуситы, ангины и другие ЛОР-заболевания.
• Кал - для диагностирования дисбактериоза и прочих нарушений желудочно-кишечного тракта.
• Желчь - при наличии воспалительных заболеваний печени, поджелудочной железы, желчного пузыря.
• Мокроты - для определения инфекций дыхательных путей, в частности, туберкулеза легких.
• Слизистая глаз - при развитии гнойных воспалений глаз и других офтальмологических патологий.
• Кожный жир - для выявления стафилококков, грибков и прочих представителей патогенной флоры, скапливающихся в эпителиальном слое кожи лица.

Механизм проведения

Процедуру лабораторного исследования условно можно разделить на несколько этапов:

• Забор материала и помещение его на специальные питательные среды. Тип используемой среды зависит от цели проведения бакпосева (выращивание одного определенного возбудителя или расшифровка бактериальных культур с целью дальнейшего построения антибиотикограммы). При необходимости жидкие среды могут заменяться впоследствии на твердые поверхности, что позволяет проводить более точную идентификацию колоний бактерий.
• Помещение питательной среды в специальное оборудование (термостат), где создаются соответствующие условия для роста и размножения патогенных возбудителей. Имеют значение показатели влажности воздуха, температуры, освещения и т. д.
• Подкрашивание материала различными реагентами для лучшего осмотра и дальнейшего анализа. За счет красителей бактерии меняют свою расцветку и становятся более заметными на общем фоне питательной среды.
• Оценка выросших колоний по определенным показателям: плотность, форма, расцветка, химический состав и т. д.

Важно! Одним из важнейших условий проведения бактериологического посева является соблюдение абсолютной стерильности помещения лаборатории, а также используемой посуды и инструментов. Для переноса материала на среду применяются такие приспособления как стеклянная палочка, бактериальная петля, пастеровская пипетка.

В данном видео, на примере бактериологического анализа мочи, рассказывается о принципе проведения бакпосева.

Расшифровка бакпосева

Результат анализа оценивается по нескольким показателям, учитывающим не только качественный фактор (подтверждение наличия бактерий-возбудителей в среде), но и количественный - то есть, степень концентрации патогенных микроорганизмов в исследуемом материале. Для подсчета количества микробных клеток используется понятие колониеобразующей единицы (КОЕ), по которому можно определить уровень насыщенности бактериями изучаемого образца.

Выделяют 4 степени роста возбудителей:

• Первая - скудный рост бактерий на жидкой питательной среде и отсутствие роста на твердой среде. Такой результат не считается отклонением от нормы.
• Вторая - рост бактерий на твердой среде до 10 колоний. Свидетельствует не о наличии болезни, а скорее о загрязненности лабораторных принадлежностей для исследования.
• Третья - рост бактерий на твердой среде в пределах 10-100 колоний.
• Четвертая - более 100 колоний.

В заключении, выдаваемом на руки пациенту, результаты бакпосева обозначаются следующим образом:

• указывается название выявленного возбудителя на латинском языке (например, Trichomonas vaginalis - трихомонада);
• прописывается концентрация микроорганизма, выращенного в условиях питательной среды (норма - до 10 3 КОЕ/мл, ненорма - от 10 5 КОЕ/мл);
• указывается характер среды: флора условно-патогенна, патогенная.

Одновременно с определением концентрации бактерий производится анализ их чувствительности к антибиотикам. Наличие положительной реакции на тот или иной антибактериальный препарат обозначается символом «S», отрицательной - «R».

Правила проведения бакпосева на микрофлору у женщин

Перед сдачей анализа необходимо учесть ряд обязательных требований в части соблюдения правил личной гигиены, а также непосредственно механизма забора биологического материала. Заключаются они в следующем:

• за сутки до процедуры избегать половых контактов любого вида (анальный, оральный, вагинальный);
• не проводить спринцевания, ванночки, примочки на половые органы и прочие антисептические процедуры;
• отказаться от применения вагинальных свечей, таблеток;
• мазок должен браться не ранее, чем через 2 недели после менструации;
• за месяц до анализа исключить прием антибиотиков;
• не мочиться перед забором материала на протяжении 2-х часов.

Для исследования могут использоваться заборы из влагалища, мочеиспускательного канала, шейки матки, цервикального канала. Перед началом процедуры делается тщательная обработка половых органов, при необходимости вход в вагину закрывается ватным тампоном. При анализе мочи берется ее средняя порция, помещаемая затем в стерильную баночку. Моча должна быть обработана в течение 2-х часов после забора и храниться при температуре не выше 20°С.

Правила проведения бакпосева на микрофлору у мужчин

В качестве материала для исследования может использоваться эякулят (сперма), кровь, моча, секрет простаты. Для получения максимально точного результата мужчинам следует придерживаться таких требований перед сдачей анализа:

• воздержаться от сексуальных контактов за 1-2 перед тестированием на бакпосев;
• исключить прием антибиотиков за 3-4 недели до сдачи анализа;
• не мочиться за 4-5 часов до взятия пробы;
• тщательно вымыть половые органы и сменить нижнее белье.

О любых изменениях в самочувствии следует незамедлительно сообщать врачу во избежание получения некорректных результатов анализа.

Бакпосев при беременности

Любая бактериальная инфекция, «дремлющая» в организме женщины, может отрицательно повлиять на течение беременности, привести к заражению плода, а в некоторых случаях даже спровоцировать выкидыш на ранних сроках. Чтобы обезопасить себя и будущего ребенка от различных патологий, необходимо осознанно подходить к планированию зачатия и при необходимости проводить соответствующую антибактериальную терапию.

Среди показаний для проведения бакпосева выделяют следующие:

• наличие воспалительных заболеваний половых органов и мочеполовой системы;
• выявление причин невынашиввания при предварительном диагнозе - бесплодие;
• диагностика воспаления предстательной железы (у мужчин);
• подготовительные действия к зачатию ребенка;
• выбор правильной схемы лечения при наличии мочеполовых инфекций;
• частая смена половых партнеров и пренебрежение механической контрацепцией (презерватив);
• внематочная беременность (наступившая или присутствовавшая в прошлом).

Серьезную опасность для здоровья женщины, особенно в период беременности, представляет заболевание уреаплазмозом. Поскольку чаще всего оно протекает бессимптомно, вызывая впоследствии ряд серьезных осложнений (эндометрит, воспаление матки и т. д.), то своевременное диагностирование инфекции помогает провести необходимую терапию и снизить риск инфицирования ребенка в процессе вынашивания и родов.

Сроки готовности

Сроки готовности анализа зависят от вида исследуемого материала и могут варьироваться от 3 до 14 дней. При взятии мазка из урогенитального тракта продолжительность теста занимает в среднем 7 дней. Посевы на микрофлору (у мужчин и женщин) длятся 5-8 дней. Предварительный результат можно получить не ранее 3-х дней поле сдачи мазка.

При относительной длительности и специфики проведения бактериологического посева на сегодняшний день данный вид лабораторного исследования является одним из самых точных и эффективных способов диагностики, позволяющий не только определить тип болезнетворных организмов, но и спланировать схему борьбы с выявленным заболеванием.

Классическое бактериологическое исследование - «золотой» стандарт микробиологической диагностики.

Цель бактериологического исследования - выделение чистой культуры возбудителя и ее идентификация.

Алгоритм бактериологического исследования:

Первичная микроскопия исследуемого материала (необязатель­ный этап, в зависимости от характера материала);

Первичный посев с целью выделения чистой культуры;

Накопление чистой культуры;

Изучение комплекса биологических свойств выделенной культуры;

Окончательная идентификация возбудителя.

1-й день исследования

1. Первичная микроскопия

Результат первичной микроскопии дает ориентировочное представление о наличии в клиническом материале различных морфологических форм микроорганизмов, а также позволяет провести их первичную идентификацию по морфолого-тинкториальным свойствам и существить выбор сред для первичного посева.

Гнойное отделяемое - первичная микроскопия обязательна.

Спинномозговая жидкость - первичная микроскопия осадка обязательна.

Мокрота - первичную микроскопию проводят из разведений 10 4 -10 5 .

Мазки из зева и носа - первичную микроскопию не проводят.

Кровь - первичную микроскопию не проводят.

Фекалии - первичную микроскопию не проводят.

2. Первичный посев

Исследуемый материал после первичной микроскопии или без нее (фекалии, моча, мазок из носа и зева, кровь) засевают на соответ­ствующие среды, для выделения чистой культуры:

Сахарный бульон, кровяной агар - для стрептококков;

Желточно-солевой агар, кровяной агар - для стафилококков;

Среда Эндо - для бактерий семейства Enterobacteriaceae;

МПА (мясо-пептонный агар) - для грамотрицательных бактерий;

МПА (посев по методу Шукевича) - для выделения протея;

Среда Китта-Тароцци - для выделения анаэробов;

Среда Сабуро - для выделения грибов.

Посев является первым этапом бактериологического исследования (если не проводят первичную микроскопию).

Посев осуществляется следующим образом:

Посев штрихом с обжигом петли. Материал забирают прокаленной бактериологической петлей и штрихом густо засевают верхнее поле чашки. Далее петлю опять прокаливают и вносят в густо засеянный сектор и проводят 2-3 вертикальные линии по всей чашке. После этого чашку переворачивают, густо засеянный сек­тор остается на нижнем поле чашки. Петлю опять прокаливают, и посев разносят по чашке 2-3 горизонтальными штрихами.

Посев шпателем. Материал наносят на поверхность среды шпате­лем или пипеткой, а затем шпателем рассеивают по всей поверх­ности.

Посев тампоном. Для посева тампон с исследуемым материалом вносят в чашку и круговыми движениями втирают его содержи­мое в питательную среду.

Посев по секторам. При таком посеве дно чашки расчерчивают на секторы, посев проводят штриховыми движениями от края чашки к центру и по секторам.

2-й день исследования

1. Проводят учет роста на питательных средах как однородный или неоднородный.

2. Проводят описание культуральных свойств.

Алгоритм описания колоний

В результате роста на питательной среде образуются колонии (потомки одной клетки). Отбирают изолированные колонии и изуча­ют их - начинается второй этап исследования, направленный на изучение культуральных свойств бактерий. Знания этих свойств необходимы для идентификации полученной чистой культуры, так как каждому виду микроорганизмов при росте на определенной пита­тельной среде соответствуют определенные культуральные свойства.

Колонии изучают:

Макроскопически: невооруженным глазом в проходящем и отра­женном свете;

Микроскопически: при малом увеличении сухой системы микро­скопа.

В проходящем свете изучают:

Величину колоний (крупные, средние, мелкие, карликовые);

Форму колоний (правильная, неправильная, круглая);

Прозрачность колоний (прозрачная, непрозрачная).

В отраженном свете определяют:

Цвет (бесцветные или окрашенные);

Характер поверхности (гладкая, бугристая, блестящая, шерохова­тая);

Высоту колоний над поверхностью среды (вдавленная, плоская, возвышающаяся).

Микроскопически оценивают:

Край (ровный, неровный);

Структуру (гомогенная, негомогенная).

Изучение колоний заканчивается приготовлением мазка, окраской его по методу Грама и микроскопией.

При взятии материала из колонии для приготовления мазка оцени­вают ее консистенцию (мягкая, слизистая, сухая).

Если при микроскопии культура оказалась чистая, то ее пересева­ют на скошенный агар для накопления.

3-й день исследования

1. Описание характера роста на скошенном агаре:

Однородный, неоднородный;

По штриху, сплошной, сливной.

2. Проверка чистоты накопленной культуры. Готовят мазки, окра­шивают по Граму и микроскопируют. Если накоплена чистая культу­ра, то она подвергается дальнейшей идентификации. Идентификация бактерий до рода и вида основана на изучении особенностей мета­болизма - биохимическая идентификация и антигенного строения - серологическая идентификация.

3. Изучение биохимических свойств. Биохимические свойства - способность бактерий расщеплять те или иные субстраты за счет продукции соответствующих ферментов. Для изучения биохимиче­ских свойств используют дифференциально-диагностические среды, содержащие различные субстраты (пестрый ряд). В их состав входят среды Гисса с углеводами, лакмусовое молоко, желатин, среды с ами­нокислотами, МПБ (мясо-пептонный бульон) с индикаторами на сероводород и индол.

Сахаролитические свойства изучают на средах Гисса. В их состав входят пептонная вода, субстрат-углевод (различные моно- и полисахариды), многоатомные спирты и индикатор.

Если у бактерий есть ферменты, расщепляющие субстрат-углевод, то они выделяют продукты метаболизма (кислоту или кислоту и газ). При кислотообразовании индикатор меняет цвет среды, при газообразовании регистрируют разрывы среды.

Протеолитические свойства изучают при посеве на желатин и лакмусовое молоко. Если у бактерий есть протеазы, то желатин разжижается. В молоке появляется сгусток кремового цвета, а над ним жидкость - пептонизация молока (за счет того, что протеазы бактерий расщепляют казеин молока до пептона).

Пептолитические свойства. Чаще бактерии способны расщеплять промежуточные продукты распада белков - пептоны. Продукты этого процесса: амины (скатол, индол), аминокислоты, газы (сероводород, аммиак, углекислый газ). Их можно обнаружить с помощью индикаторной бумаги:

Лакмусовая - для выявления аммиака;

Смоченная щавелевоуксусной кислотой - для выявления индола;

Смоченная ацетатом свинца - для выявления сероводорода. Продукты дезаминирования и декарбоксилирования аминокислот обнаруживают с помощью тест-полос, изменяющих свой цвет при изменении рН среды.

4-й день исследования

1. Проводят учет результатов биохимических тестов. После того как культура идентифицирована до вида, у нее изучают ряд дополнитель­ных признаков, таких как чувствительность к антибиотикам, токсигенность, наличие факторов вирулентности, плазмидный профиль, а также проводят внутривидовую дифференцировку.

2. Результаты биохимической идентификации служат основанием для проведения серологической идентификации. Серологическую идентификацию выделенной культуры проводят в реакции агглю­тинации на стекле с помощью соответствующих иммунных адсор­бированных сывороток, выбор которых определяется результатами биохимической идентификации.

Внутривидовая дифференциация - определение принадлежности штамма к тому или иному фаговару, бактериоциногеновару, бактериоциновару, биовару, резистовару и т.д. Она позволяет выявить эпи­демиологические связи между штаммами одного вида.

Идентификация выделенной культуры позволяет сделать заклю­чение о том, какой микроорганизм служит этиологическим фактором заболевания. При выделении условно-патогенных бактерий необхо­димо соблюдать критерии этиологической значимости:

Присутствие бактерий в материале из патологического очага в количестве не менее 10 5 КОЕ мл /г;

Повторное выделение из материала той же культуры;

Нарастания титра Ат в сыворотке крови больного к аутоштамму в 4 раза и более.

Определение фаговаров бактерий (фаготипирование)

Определение фаговаров проводят по эпидемиологическим пока­заниям для установления эпидемиологических связей между забо­левшими. Для проведения исследования берут чашки Петри с МПА, подсушивают поверхность, расчерчивают дно на квадраты и марки­руют. Далее 3-4-часовую культуру в бульоне засевают газоном, под­сушивают и на каждый квадрат наносят каплю соответствующего типового фага в рабочем разведении. Посевы помещают в термостат на сутки. Через 24ч учитывают спектр чувствительности культуры к определенным фагам по литическому действию.

определение бактериоциновара

Для определения бактериоциновара определяют чувствительность исследуемых штаммов к эталонным бактериоциноварам. Как и фаго- типирование, его проводят по эпидпоказаниям.

Для проведения исследования соответствующие стандартные культуры-продуценты типовых бактериоцинов засевают на питательные среды. Посевы помещают в термостат при 37 °С на 48 ч.

Выросшие колонии индикаторных культур инактивируют хлоро­формом, после чего на поверхность наливают 2-4 мл расплавленного агара, в который предварительно вносят 0,2 мл исследуемой 4-часовой бульонной культуры. После того как агар застыл, посевы вновь поме­щают в термостат на 18-24 ч. Через указанное время учитывают нали­чие зон задержки роста вокруг индикаторных культур, тем самым определяют бактериоциновар изучаемых бактерий.

©2015-2019 сайт
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2016-04-27